紧接着第二季的故事，21年前，一股神秘恐怖的邪恶力量夺走了Sam Winchester和Dean Winchester的母亲。他们的父亲John把兄弟俩当成士兵一样养大，告诉他们黑暗的角落里躲藏着可怕的恶灵，教导他们辨认史籍中形形色色的鬼怪……并手把手指导他们杀死这些恶魔。然而，Sam ... 不想再过这种动荡不安的生活，独自一人前往斯坦福求学。直到有一天哥哥Dean带着坏消息出现在他家门口：父亲在一次猎鬼之旅中失踪。于是Sam和Dean驾驶着一辆1967年Chevy Impala车，在美国的高速公路网穿梭了整整一年，寻找父亲的踪迹。沿途，他们经历了各种超自然时间，同时兄弟之间也矛盾不断。最终，兄弟俩找到了父亲，三人一同追踪杀害母亲的黄眼恶魔。经过一场恶战，父子三人身负重伤，恶魔也趁乱逃跑了。Winchester兄弟的任务仍在继续。他们走遍全国，遭遇了形形色色的超自然生物—吸血鬼、幽灵、亡魂、甚至死神，而对于大多数人来说，这些东西只存在于传说迷信及噩梦之中。无论走到哪儿，两兄弟从未放弃寻找害得他们家破人亡的黄眼恶魔。在最近一次对抗中，黄眼恶魔提到，他为“Sam和其他像他一样的孩子”制定了计划。现在，Sam必须查出其中含义，寻找埋藏在自己及家族过去中的黑暗秘密。
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